新闻资讯/NEWS

首页   >    新闻资讯   >   如何做好液相色谱柱的维护工作,看完本篇你就明白了

如何做好液相色谱柱的维护工作,看完本篇你就明白了

点击次数:43次  发布时间:2022-07-25
  液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
 
  液相色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
 
  液相色谱柱的维护分为: 色谱柱的平衡、色谱柱的再生、最后才是色谱柱的维护。下面详解:
 
  一、色谱柱的平衡
 
  反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤:
 
  1.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
 
  2.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
  二、色谱柱的再生
 
  长期使用的色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
 
  三、色谱柱的维护
 
  1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
 
  2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
 
  3.避免流动相组成及极性的剧烈变化
 
  4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
 
  5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中
 
  6.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
上一篇:没有了    下一篇:乘风破浪 砥砺前行 | 普敦四周岁快乐!
关注我们:

© 2018 普敦科技 版权所有  备案图标.png    管理登陆    技术支持:化工仪器网    GoogleSitemap

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我