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AUTO M32助力临床诊断 | 彻底解放双手!

点击次数:161  发布时间:2022-07-18

关于儿茶酚胺

嗜铬细胞瘤(Pheochromocytoma)是一种罕见疾病,每10万人中的年诊断率为1~2例。嗜铬细胞瘤会引起儿茶酚胺的分泌增加,其血浆浓度测定可为临床高血压诊治和嗜铬细胞瘤诊断定位提供有力数据支撑。当它的含量发生显著变化时,就代表人体出现了病态。

 

随着分析科学的蓬勃发展,人们对儿茶酚胺的研究更加深入,目前最常见的有液相色谱法、气相色谱法、荧光法等,由于样本的基质为人体血浆,成分复杂,故样品前处理的提取和净化尤为重要。



普敦科技对此提出相应解决方案

使用磁性固相萃取剂,搭配AUTO M32全自动提取仪,结合液相色谱质谱联用仪测定血浆中的E、NE、DA、MN、NMN和3-MT。儿茶酚胺及其代谢物均为碱性强极性化合物,使用离子交换原理的WCX Plus磁性固相萃取剂进行提取和净化。


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分离纯化过程

WCX Plus磁性固相萃取剂键合了羧酸根基团,在溶剂体系pH值中性或偏碱性条件下电离并带负电荷,以电荷吸引作用吸附目标化合物正离子[ M ]+达到捕集的效果。通过调节溶剂pH值至3以下时,羧酸根饱和而处于电中性,失去电荷吸引的[ M ]+被洗脱至溶剂中,从而实现与杂质的分离纯化。

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磁性固相萃取

移取对应溶剂于专用96孔板内,并设定AUTO M32全自动提取仪方法,运行样品进行磁性固相萃取。完成后,取洗脱液注入LC-MS/MS测试。

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实验结论

取某正常人血浆,添加六种儿茶酚胺类目标物,两次平行处理。所得回收率95.2-116%相对标准偏差1.4-9.3%

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取血浆浓度为0.2ng/mL(3-MT,0.02ng/mL)标准样品平行处理六次,内标峰面积相对标准偏差4.4-9.7%。

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六种儿茶酚胺类标准曲线线性及其准确度

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综上数据可以看出,使用WCX Plus磁性固相萃取剂,结合AUTO M32全自动提取系统,提取和净化血浆中儿茶酚胺类目标物。经LC-MS/MS分析测试,线性良好,结果准确精密,符合基本定量测试的方法学要求。


同时,大幅度减少传统SPE的移液操作和人为实时监测,节约了人力及时间成本,并显著降低了人为因素在前处理中的影响。


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AUTO M32全自动提取仪



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